可用于流感疫苗生产的MDCK细胞无血清单细胞悬浮培养体系的开发

近年来,因流感病毒侵害,人类健康和动物产品工业每年都要蒙受巨大损失。传统的流感疫苗生产多采用鸡胚培养过程,但该生产过程具易受微生物污染、内毒素残余量高、对流感大流行应急能力差等缺点,因此动物细胞制病毒疫苗工业的发展变得尤为重要。MDCK等细胞具有培养容易、增殖快、流感病毒感染效率高等特点,是适合用作流感病毒疫苗生产的重要细胞系之一。

威朗公司与福州大学合作建立了专门的试验平台并在业内专家的指导下初步建立了MDCK悬浮细胞基础种子库和生产细胞库。通过长时间试验，驯化出适应无血清悬浮培养的MDCK细胞。并完成适应性传代实验。在此基础上通过基因改造（插入抗细胞附着基因和流感病毒受体基因），增加细胞悬浮培养特性和对禽流感病毒的敏感性，并以之作为载体培养流感病毒，获得较高的病毒滴度，为开发和建立MDCK单细胞无血清悬浮培养体系大规模生产流感病毒疫苗奠定了基础。

威朗所开发的MDCK细胞应用于大规模细胞悬浮培养生产（7L～50L～250L～1000L细胞罐），具有如下特点（见表1）：

1、细胞活性高：＞95%

2、密度高：＞9×10⁶cells/ml

3、接毒后获得的抗原HA滴度高：＞9log2

4、免疫21天HI抗体效价：＞8log2